生物化工
胰蛋白酶抗原修复的介绍
2021-11-25 10:03  浏览:91
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  ➤胰蛋白酶抗原修复的介绍属于精细化学品中的生物化工

产品介绍:

抗原修复用于甲醛固定的石蜡包埋组织切片。石蜡切片标本用甲醛固定,使得细胞内抗原形成醛键、 羧甲键而被封闭了部分抗原决定簇, 同时蛋白之间发生交联而使抗原决定簇隐蔽。所以要求在进行免疫组化染色时,需要行抗原修复或暴露,即将固定时分子之间所形成的交联破坏,而恢复抗原的原有空间形态。

酶消化方法是常用的抗原修复方法之一,常用 0.1%胰蛋白酶和 0.4%胃蛋白酶液。一般说来,胰蛋白酶消化能力较胃蛋白酶弱,主要用于细胞内抗原的消化,胃蛋白酶主要用于细胞间抗原的消化。工作中要认真参照抗体说明书指示进行消化酶的选择,这样针对性更强,标记效果更理想。

操作说明:

胰蛋白酶使用前预热 37℃,切片也预热 37℃,消化时间约为 5~30 分钟;胃蛋白酶消化 37℃时间为 30 分钟。适用于被固定遮避的抗原,其中有:Collagen,Complement,Cytokeratin,C-erB-2,GFAP,LCA,LN 等。

胰蛋白酶处理

1、滴加一滴胰蛋白酶工作液于组织上。

2、室温或 37℃孵育 20-40 分钟,孵育时间的长短依福尔马林固定时间及所测抗原情况而定。

3、蒸馏水冲洗,终止反应。

4、阻断内源性过氧化物酶。

5、免疫组化染色。

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